河南农业科学 ›› 2010, Vol. 39 ›› Issue (2): 97-101.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.02.028

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猪链球菌ZKHY株gdh基因的克隆与序列分析

刘春生1;王新娟1;徐耀辉2;王川庆1;杨霞1;陈陆1;徐雪1   

  1. 1河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;2郑州牧业工程高等专科学校,河南郑州450011
  • 出版日期:2010-02-15 发布日期:2010-02-15
  • 基金资助:
    河南省重大科技攻关项目(072102130009)

  • Published:2010-02-15 Online:2010-02-15

摘要: 对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,以ZKHY株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基图片段,克隆于pMD-18T载体,转化宿主菌JM109中进行序列测定。将测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析。序列分析显示,成功克隆了猪链球菌ZKHY株的gdh基因,ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有密切的亲缘关系,核酸序列与血清2、7、9型的同源性为97.2%~98.4%,其中与2型菌株同源性为97.2%~97.3%;与7型菌株同源性为98.4%;与9型菌株同源性为97.6%。其编码的氨基酸序列同源性则更高,与GenBank中已收录的序列同源性在98.9%以上。ZKYH株可能是属于2、7、9型之外的其他血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守,可以进行表达以用作免疫学方面的相关研究。

关键词: 猪链球菌, 谷氨酸脱氢酶基因, 克隆, 序列分析

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