河南农业科学 ›› 2007, Vol. 36 ›› Issue (10): 72-76.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2007.10.023

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发根农杆菌介导的怀地黄遗传转化研究

付建喜1;范喜梅2;周春娥1;谷凤平1;王芳1;周延清1   

  1. 1河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007;2焦作师范高等专科学校,河南焦作454000
  • 出版日期:2007-10-15 发布日期:2007-10-15
  • 基金资助:
    国家高技术研究发展计划(863计划)(2006AA100109)子课题;国家“十五”科技攻关项目(2004BA72IA25);国家“十一五”科技支撑项目(2006BRI06R12-06)

  • Published:2007-10-15 Online:2007-10-15

摘要: 利用发根农杆菌转化怀地黄组培苗子叶、叶柄和茎段,建立了有效的毛状根培养及其植株再生体系。毛状根可直接从受伤的外植体产生,能在无外源激素的1/2MS固体和液体培养基上自主生长,表现出典型的发根特征。毛状根在附加0.2mg/LKT和3.0mg/L6-BA的1/2MS培养基上能100%形成愈伤组织,51.49%分化出芽;分化芽在1/2MS培养基上100%生根,形成具有矮化、节间短和根系发达等特征的转化再生植株且移栽后生长旺盛。rolB基因PCR和冠瘿碱纸电泳检测证明,农杆菌Ri质粒上的T-DNA整合到怀地黄基因组中并表达,获得转基因怀地黄。

关键词: 怀地黄, 毛状根, 植株再生, 冠瘿碱纸电泳, PCR

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