萼脊兰SeAP1-like基因的克隆与表达载体构建

河南农业科学 ›› 2015, Vol. 44 ›› Issue (1): 105-109.

萼脊兰SeAP1-like基因的克隆与表达载体构建

蒋素华¹，袁秀云¹, 王洁琼²，武振江²，张国付²，崔波^1,*

1.郑州师范学院生物工程研究所，河南郑州 450044；2.河南农业大学生命科学学院，河南郑州 450002

收稿日期:2014-08-22 出版日期:2015-01-15 发布日期:2015-01-15
通讯作者: 崔波（1962-），男，河南泌阳人，研究员，博士，主要从事植物分子生物学研究。E-mail：laocuibo@163.com
作者简介:蒋素华（1983-），女，河南漯河人，讲师，硕士，主要从事兰花分子育种研究。E-mail：975173496@qq.com
基金资助:

河南省重点科技攻关项目(092102110128)；郑州市重大科技专项(112PZDZX030)

Received:2014-08-22 Published:2015-01-15 Online:2015-01-15

摘要/Abstract

摘要： 根据NCBI网站上萼脊兰AP1-like全长基因序列设计引物,采用RT-PCR法从萼脊兰花瓣中扩增Se AP1-like基因,对扩增产物进行克隆和测序。结果表明,获得的萼脊兰Se AP1-like基因为743 bp,编码247个氨基酸。将Se AP1-like基因插入p CAMBIA1304载体中,经PCR、双酶切鉴定,证实重组表达质粒中含有目的片段,表明成功构建了高效植物表达载体p CAMBIA1304-Se AP1。对Se AP1-like基因的结构域和所表达蛋白质的亲水性进行了分析,并预测了该基因所表达蛋白的二维结构。结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守域,属于MADS-box基因家族,该蛋白分子属于亲水性蛋白。二级结构分析表明,其包含57.49%的α螺旋、6.07%的延伸链、36.44%的不规则折叠。

关键词: 萼脊兰, SeAP1-like基因, 克隆, 载体构建

蒋素华，袁秀云，王洁琼，武振江，张国付，崔波. 萼脊兰SeAP1-like基因的克隆与表达载体构建[J]. 河南农业科学, 2015, 44(1): 105-109.

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