河南农业科学 ›› 2021, Vol. 50 ›› Issue (12): 149-154.DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2021.12.017
所属专题: 非洲猪瘟专题
颜世君1,2,郝丽影3,白露露1,2,郑丁丁3,宋欢欢1,2,李胜强1,2,王同燕1,2,谭菲菲1,2,邓均华3,田克恭1,2,3
YAN Shijun1,2,HAO Liying3,BAI Lulu1,2,ZHENG Dingding3,SONG Huanhuan1,2,LI Shengqiang1,2,WANG Tongyan1,2,TAN Feifei1,2,DENG Junhua3,TIAN Kegong1,2,3
摘要: 为研发非洲猪瘟病毒的免疫诊断学试剂,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达非洲猪瘟病毒p22蛋白,制备抗p22蛋白单克隆抗体并鉴定其与非洲猪瘟病毒的反应性。结果显示,成功制备重组杆状病毒AcNPV-p22,表达得到大小约22 ku可溶性的重组p22蛋白。Western blot鉴定结果表明,重组p22蛋白可以与非洲猪瘟病毒阳性血清发生特异性反应。筛选到能够稳定分泌抗非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3D2、4A7),腹水ELISA效价均高于1∶128 000;单克隆抗体亚类分型鉴定结果表明,重链均为IgG1,轻链均为κ;间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,制备的单克隆抗体能与非洲猪瘟病毒发生特异性反应。综上,利用杆状病毒-昆虫表达系统成功表达了可溶性的非洲猪瘟病毒重组p22蛋白,并制备抗p22蛋白单克隆抗体。
中图分类号: