猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化

河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (5): 141-144.

猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化

刘永晖¹，张改平²，乔松林²，刘明阳¹，蒋志政¹，王蕊¹，万博²，鲍登克²，王爱萍^１*

1.郑州大学生物工程系，河南郑州 450001；2.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002

收稿日期:2011-12-30 出版日期:2012-05-15 发布日期:2012-05-15
通讯作者: 王爱萍（1970-），女，青海西宁人，教授，主要从事动物免疫学研究。E-mail：pingaw@126.com
作者简介:刘永晖（1983-），男，北京怀柔人，在读硕士研究生，研究方向：动物免疫学。E-mail：bjliuyonghui@163.com
基金资助:
国家自然科学基金项目(30730068)

Received:2011-12-30 Published:2012-05-15 Online:2012-05-15

摘要/Abstract

摘要： 为了解nsp7重组蛋白的免疫学活性,采用RT-PCR的方法从猪繁殖与呼吸道综合症病毒(PRRSV)BJ-4毒株中扩增得到nsp7基因,将基因连接到pET-28a载体并转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达,利用Ni-NTA进行亲和纯化,通过SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行分析和鉴定,通过间接ELISA方法研究了重组蛋白的免疫学活性。结果表明,成功制备了nsp7重组蛋白,间接ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,为建立nsp7特异性抗体的间接ELSIA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合症病毒, nsp7蛋白, BJ-4病毒, 核表达

刘永晖，张改平，乔松林，刘明阳，蒋志政，王蕊，万博，鲍登克，王爱萍. 猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化[J]. 河南农业科学, 2012, 41(5): 141-144.

[1]	陈甜梦, 蔡彤璇, 王嘉璐, 田牧野, 赵宝华, 刘东. 嗜水气单胞菌外膜蛋白TolB 的原核表达及生物信息学分析[J]. 河南农业科学, 2024, 53(2): 136-143.
[2]	徐佳, 孙怀昌. 牛支原体Vsp 蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备[J]. 河南农业科学, 2023, 52(12): 142-148.
[3]	王书利, 魏淑娟, 李梦含, 郑好, 司丽芳, 李志强. 布鲁氏菌分泌蛋白BspA 和BspB 真核表达载体的构建及在胚胎滋养层细胞中的表达[J]. 河南农业科学, 2022, 51(8): 143-149.
[4]	路庆君, 罗竹星, 刘华伟, 魏梦, 王圆, 张照锋, 李游山. 家蚕丝腺中Abd-A 3 种剪接体的克隆、序列分析及原核表达[J]. 河南农业科学, 2022, 51(4): 138-150.
[5]	简思杰, 晁嘉, 孙薇, 陈锐, 丁锐, 陈琛, 刘祥. 嗜水气单胞菌外膜蛋白AHA1182 的原核表达、纯化与免疫原性研究[J]. 河南农业科学, 2022, 51(11): 135-144.
[6]	耿笑林, 孙杰, 王彦伟, 黄甜, 刘鹏, 曹红梅, 逄文强, 郝丽影, 邓均华, 黄玉欣, 田克恭. 非洲猪瘟病毒K145R 蛋白的原核表达及其单克隆抗体制备[J]. 河南农业科学, 2021, 50(8): 154-159.
[7]	王勋, 张雨杭, 孙亚宁, 李青梅, 李鸽, 王丽, 郭军庆, 邓瑞广, 张改平. CRISPR/Cas13a重组蛋白表达纯化及其连带剪切酶活性的鉴定[J]. 河南农业科学, 2021, 50(4): 147-153.
[8]	荣娜, 简思杰, 孙薇, 康超, 陈琛, 刘祥. 鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC的原核表达及抗原性分析[J]. 河南农业科学, 2021, 50(3): 157-164.
[9]	谭政委, 李磊, 余永亮, 许兰杰, 杨红旗, 董薇, 鲁丹丹, 马新明, 梁慧珍. 红花1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶基因CtDXS1的克隆及表达分析 [J]. 河南农业科学, 2021, 50(2): 39-49.
[10]	李恭贺, 陈秋玉, 吴文德, 郑喜邦. 水牛瘦素基因的真核表达及生物学特性分析[J]. 河南农业科学, 2021, 50(10): 132-137.
[11]	刘艳阳, 武轲, 梅鸿献, 杜振伟, 崔承齐, 江晓林, 郑永战. 芝麻抗裂蒴基因SiIND1的克隆与原核表达[J]. 河南农业科学, 2020, 49(5): 63-68.
[12]	王雨, 王兆广, 刘泽军, 夏中曦, 范玉顶, 钟其旺. 黄鳝atrogin-1蛋白表达及细胞定位研究[J]. 河南农业科学, 2020, 49(5): 154-160.
[13]	滕蔓, 迟佳琦, 柴书军, 罗俊. 鸡LTBP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 河南农业科学, 2020, 49(12): 144-150.
[14]	连凯琪, 周玲玲, 张明亮, 张慢, 王英杰, 林正丹, 宋玉伟. 塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备[J]. 河南农业科学, 2020, 49(1): 123-127.
[15]	张娴, 李超林, 郑乔木, 严子成, 廖海, 周嘉裕. 菜青虫胰凝乳蛋白酶基因PrCT1的克隆及表达分析[J]. 河南农业科学, 2019, 48(9): 74-81.

猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化

PDF

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics