河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (5): 37-41.

• 作物栽培 遗传育种 • 上一篇    下一篇

发根农杆菌介导不同基因型大豆转化效率的筛选

李锦锦1,2,王 昉3,张万科3,文自翔2,李海朝2,袁道华2,李金英2,张 辉2,杨青华1,卢为国2*   

  • 收稿日期:2012-01-11 出版日期:2012-05-15 发布日期:2012-05-15
  • 通讯作者: 卢为国(1971-),男,河南伊川人,研究员,博士,主要从事大豆遗传育种研究。E-mail:123bean@163.com
  • 作者简介:李锦锦(1986-),女,河南巩义人,在读硕士研究生,研究方向:大豆遗传育种。E-mailhappyjinjin213@126.com:
  • 基金资助:
    转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08009-054B);河南省创新型科技人才队伍建设工程项目(094100510004);郑州市创新型科技人才队伍建设工程项目(096SYJH14103)

1.河南农业大学 农学院,河南 郑州 450002;2.河南省农业科学院 经济作物研究所/国家大豆改良中心郑州分中心,河南 郑州 450002;3.中国科学院 遗传与发育生物学研究所,北京 100101   

  • Received:2012-01-11 Published:2012-05-15 Online:2012-05-15

摘要:  基因型是影响发根农杆菌转化大豆的主要因素之一,为筛选转化效率高的大豆基因型,利用不同基因型大豆的下胚轴接种发根农杆菌K599(含GUS基因),待长出毛状根后,根据不同基因型大豆发根诱导率和发根数的差异,选择适宜大豆基因型进行GUS基因的组织化学染色和RT-PCR分析。结果表明,34个大豆基因型发根诱导率和发根数有很大差异,选择发根诱导率大于60%以及发根数大于1.6条的20个大豆基因型毛状根进行GUS基因组织化学染色,其中Y091、Z184、P108、L010等4个大豆基因型的GUS基因转化效率较高,分别为96.2%、91.7%、87.5%、86.4%;进一步对以上4个大豆基因型毛状根进行RT-PCR分析,结果表明,GUS基因均得到了正确转录。表明大豆基因型Y091、Z184、P108、L010是发根农杆菌转化大豆较为理想的受体材料。

关键词: 发根农杆菌, 大豆, 毛状根, GUS基因转化效率