棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建及致病缺陷突变体筛选

河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (1): 69-73.

棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建及致病缺陷突变体筛选

谷素静，汪敏，桑茜，赵静，李洪连?

河南农业大学植物保护学院，河南郑州 450002

收稿日期:2013-06-22 出版日期:2014-01-15 发布日期:2014-01-15
通讯作者: 汪敏（1974-），男，河南新县人，副教授，博士，主要从事植物真菌病害研究。E-mail: wangm05@sohu.com 李洪连（1963-），男，河南夏邑人，教授，博士，主要从事小麦土传病害研究。E-mail: honglianli@sina.com
作者简介:谷素静（1987-），女，河南漯河人，在读硕士研究生，研究方向：植物病原真菌生物学。E-mail: gusujing123@163.com
基金资助:
国家自然科学基金项目(30700520);河南省自然科学基金项目(2008A208015);河南省教育厅科学技术研究重点项目(14A210025)

Received:2013-06-22 Published:2014-01-15 Online:2014-01-15

摘要/Abstract

摘要： 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)侵染引起的棉花黄萎病是棉花生产上的重要病害之一,而其致病的分子机制尚不清楚,为此,以强致病力落叶型黄萎病菌FGH₂为材料,利用农杆菌介导转化技术构建棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库并进行致病缺陷突变体的筛选。当农杆菌与黄萎病菌分生孢子浓度比为250∶1、承载介质为NC膜、乙酰丁香酮浓度400 μmol/L、共培养时间48 h时,转化效率高达每10⁶个分生孢子产生612.5个转化子。通过采用优化后的转化体系,构建了含1 200个T-DNA插入转化子的棉花黄萎病菌突变体库。利用苗期分生孢子蘸根法测定300个转化子在棉花幼苗上的致病力,获得3个致病力显著降低的突变体181、546、1009,其中546的微菌核形成能力丧失,1009的微菌核形成能力明显下降。黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建,为棉花黄萎病菌致病及微菌核形成机制的研究奠定了基础。

关键词: 棉花黄萎病, 大丽轮枝菌, 农杆菌介导的遗传转化, T-DNA插入突变, 致病性

谷素静，汪敏，桑茜，赵静，李洪连?. 棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建及致病缺陷突变体筛选[J]. 河南农业科学, 2014, 43(1): 69-73.

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