河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (3): 100-102,106.

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牡丹ACS基因克隆及序列分析

高水平1,魏春梅2,刘改秀3,王丽娜3,孔祥生4,范丙友4*   

  1. 1.河南科技大学 林学院,河南 洛阳 471003;2.河南省洛阳市牡丹研究所,河南 洛阳 471022;3.洛阳国家牡丹园,河南 洛阳 471011;4.河南科技大学 农学院,河南 洛阳 471003
  • 收稿日期:2012-09-19 出版日期:2013-03-15 发布日期:2013-03-15
  • 通讯作者: 范丙友(1974-),男,河南伊川人,副教授,博士,主要从事牡丹、芍药分子生物学研究。E-mail:fanbingyou2005@163.com
  • 作者简介:高水平(1976-),女,河南洛阳人,讲师,硕士,主要从事牡丹、芍药生物学研究。E-mail:gaoshuiping1949@163.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(30740013);河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(2010GGJS-075)

  • Received:2012-09-19 Published:2013-03-15 Online:2013-03-15

摘要: ACC合成酶(ACS)是乙烯生物合成的关键酶。为了明确牡丹ACC合成酶基因的结构,基于报道的牡丹ACScDNA(DQ337250)序列,设计一对特异性PCR扩增引物,以洛阳红牡丹(Paeonia suffuticosa Andr.)新鲜叶片总DNA为模板,用高保真DNA聚合酶KOD-Plus成功地扩增出长度约为2 200bp的PCR产物;用pMD18-T载体对PCR产物进行了克隆,测序结果表明,牡丹ACS基因序列全长2 251bp,含4个外显子和3个内含子,剪接位点均为保守的5′供位GU与3′受位AG模式,4个外显子分别居于1-174、267-398、483-643、1 240-2 251bp;序列已提交至GenBank数据库,其登录号为FJ769773;牡丹ACS蛋白由492个氨基酸组成,与苹果、枇杷、西洋梨、天竺葵等ACS的相似性达74%~76%;生物信息学分析预测牡丹ACS蛋白的分子量为54.9kD,等电点为6.8,是一个定位于细胞质的不稳定的非分泌亲水蛋白。 

关键词: 牡丹, ACC合成酶基因, 基因序列, 克隆, 生物信息学分析