河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (11): 104-106.

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金花茶CnCHS基因原核表达载体的构建及表达分析

周兴文1,李纪元2,朱宇林1,孙迎坤3   

  1. 1.广西玉林师范学院 生命科学与技术学院,广西 玉林 537000;2.中国林业科学研究院 亚热带林业研究所,浙江 富阳 311400;3.青岛农业大学 园林与林学院,山东 青岛 266109
  • 收稿日期:2014-03-10 出版日期:2014-11-15 发布日期:2014-11-15
  • 通讯作者: 孙迎坤(1977-),女,山东潍坊人,讲师,博士,主要从事观赏植物分子育种研究。E-mail:sunyk678@163.com
  • 作者简介:周兴文(1979-),男,河南南阳人,副教授,博士,主要从事山茶花分子育种研究。E-mail:xingwenzhou2003@163.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31360197);广西自然科学基金项目(2012GXNSFBA053077);广西高校科研一般项目(201203YB155);玉林师范学院高层次人才科研启动基金(G20120027)

  • Received:2014-03-10 Published:2014-11-15 Online:2014-11-15

摘要: 根据已经克隆得到的金花茶(Camellia nitidissima Chi.)查尔酮合成酶基因序列,设计引物对P1/P2扩增出该基因全长并将其构建到原核表达载体pGEX-4T-1中,转入大肠杆菌BL21后,用浓度为0.4mmol/L的IPTG诱导其表达。SDS-PAGE电泳检测结果显示,被诱导的大肠杆菌菌体中出现了约68ku的特异融合蛋白,表明该基因在大肠杆菌中成功表达。 

关键词: 金花茶, 查尔酮合成酶, 原核表达