河南农业科学 ›› 2018, Vol. 47 ›› Issue (5): 124-128.

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传染性法氏囊病毒VP2蛋白的高效表达与免疫原性分析

  

  1. 1.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州450002; 2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2017-11-03 出版日期:2018-05-15 发布日期:2018-05-15
  • 通讯作者: 张改平(1960-),男,河南内黄人,研究员,博士,主要从事动物免疫学及重大疫病快速检测技术研究。E-mail:zhanggaiping2003@163.com
  • 作者简介:杨 棋(1991-),男,河南郑州人,在读硕士研究生,研究方向:动物学。E-mail:1185008049@qq.com
  • 基金资助:
    国家重点研发计划(2017YFD0501103)

  • Received:2017-11-03 Published:2018-05-15 Online:2018-05-15

摘要: 为了实现传染性法氏囊病毒(IBDV)B87毒株VP2蛋白在大肠杆菌中的高效可溶性表达,将IBDV B87毒株VP2基因插入原核表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET28a-VP2,将其转化不同大肠杆菌基因工程菌株,通过IPTG诱导表达VP2外源蛋白。利用鸡传染性法氏囊病抗原快速检测试纸筛选,确定了BL21(DE3)为VP2可溶性蛋白的高效表达菌株。SDS-PAGE、Western blot分析表明,VP2实现了可溶性表达,且可溶性VP2蛋白具有良好的反应原性。将表达的重组蛋白利用琼脂扩散试验(AGP)分析,结果表明,VP2蛋白的AGP效价达到1∶64。将重组蛋白免疫接种SPF鸡,制备的抗血清AGP效价可达1∶16,说明表达的B87毒株VP2蛋白免疫原性良好。

关键词: 传染性法氏囊病毒, B87毒株, VP2蛋白, 原核表达, 免疫原性