河南农业科学 ›› 2010, Vol. 39 ›› Issue (8): 71-76.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.08.020

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马铃薯疮痂病新致病种Streptomyces galilaeus CPS-2转化体系的建立

陈俊杰1;赵伟全1;于秀梅2;刘大群1   

  1. 1河北农业大学植物保护学院,河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,河北保定071001;2河北农业大学生命科学学院,河北保定071001
  • 出版日期:2010-08-15 发布日期:2010-08-15
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30700523); ;国家863项目(2006AA10A211); ;现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(NYCYTX-15)

  • Published:2010-08-15 Online:2010-08-15

摘要: 为建立马铃薯疮痂病新致病种Streptomyces galilaeus典型菌株CPS-2的转化体系,对该菌的原生质体制备和再生条件进行了筛选。结果表明,菌株CPS-2原生质体制备的最适条件为:TSB培养基一级培养24h,改良YEME培养基(含10%蔗糖和1.0%甘氨酸)二级培养60h,溶菌酶用量为3.0g/L,37℃酶解90 min,原生质体形成量可达4.4×109个/mL;在R2YE培养基上再生率可达22.71%。采用含25%PEG1000的Tbuffer介导转化质粒pIJ702,24h后覆盖含有硫链丝菌素的营养软琼脂,4d后可筛选到转化子,每微克质粒DNA可获得102~103个转化子。

关键词: 马铃薯疮痂病菌, 原生质体, 再生, 转化

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