河南农业科学 ›› 2008, Vol. 37 ›› Issue (8): 127-130.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2008.08.035

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H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的表达及纯化

李清州1,2;郝惠芳2;王丽2;赵绪永2;朱礼倩1;张丽萍1;邓瑞广2;张改平2   

  1. 1河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;2河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002
  • 出版日期:2008-08-15 发布日期:2008-08-15
  • 基金资助:
    国家“973”计划(2005CB523200)

  • Published:2008-08-15 Online:2008-08-15

摘要: 利用PCR方法从含禽流感病毒HA基因的质粒T—HA上扩增HA基因,再将其克隆到原核表达载体pET28a中,用E.coli BL21(DE3)原核表达,SDS—PAGE和Western--blot对表达蛋白进行鉴定。Western--blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为60kD,位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清特异性反应,具有良好的抗原性。ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV血凝素抗体具有良好的灵敏性。

关键词: 禽流感病毒, H5N1亚型, 血凝素(HA), 原核表达

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