河南农业科学 ›› 2005, Vol. 34 ›› Issue (9): 94-98.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2005.09.035

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彩色免疫金银染色法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

李新生 1;陈红英 2;崔沛 3;崔保安 2   

  1. 1河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002,中国农业大学动物医学院,北京,100094;2河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002;3河南省畜牧局,河南,郑州,450002;
  • 出版日期:2005-09-15 发布日期:2005-09-15

  • Published:2005-09-15 Online:2005-09-15

摘要: 试验首次建立了固相载体上的彩色免疫金银染色法(CIGSS)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并获得成功.用提纯的PRRSV高免兔制备高免血清,按常规方法提取兔抗PRRSVIgG,建立了检测PRRSV抗原的彩色免疫金银染色法.经方阵试验确定最佳兔抗PRRSV IgG工作浓度为1:400,金标羊抗兔IgG的工作浓度为1:1 000,银染色的时间为15 min,彩染的时间为2 min.用该法对提纯的PRRSV病毒抗原的最低检出量为1.469μg/ml,其敏感性为DIGFA的5倍.以CIGSS法检测了52份疑似PRRSV感染的猪样本,阳性率为53.84%,而检测猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪巴氏杆菌以及正常的Marc-145细胞培养物,均为阴性反应.表明该法具有快速、准确、操作简便、敏感性高、易于判断、特异性强、重复性好等优点,可用于大量PRRSV抗原样本的检测.

关键词: 彩色免疫金银染色法, 猪繁殖与呼吸综合征病毒, 检测

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