河南农业科学 ›› 2021, Vol. 50 ›› Issue (11): 139-145.DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2021.11.016
所属专题: 动物新型疫苗专题
徐冠冰1,王利平1,崔素宁1,张震1,梁雪瑞1,赵洁1,段艳红2,潘鹏涛1,李雪华2,殷俊磊1,职丽娟1
XU Guanbing1,WANG Liping1,CUI Suning1,ZHANG Zhen1,LIANG Xuerui1,ZHAO Jie1,DUAN Yanhong2,PAN Pengtao1,LI Xuehua2,YIN Junlei1,ZHI Lijuan1
摘要: 为探究ssaV基因对鸡白痢沙门菌致病性的影响,利用同源重组技术,以pKD3质粒为模板,设计同源臂,扩增外源线性DNA片段,将该片段电转化入含有pKD46的鸡白痢沙门菌C79-13,丢失pKD46后,获得重组菌C79-13ΔssaV∶∶Cm,将pCP20导入该重组菌,通过筛选获得ssaV 基因缺失株C79-13ΔssaV,同时构建其回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV),并对突变株C79-13ΔssaV 的生长特性和生化特性、遗传稳定性及毒力等基本生物学特征进行分析。PCR 扩增和测序结果显示,成功构建了缺失株C79-13ΔssaV,野生株C79-13、缺失株C79-13ΔssaV 和回补株C79-13ΔssaV(pBR322-ssaV)呈现出一致的生长特性和生化特性,突变株C79-13ΔssaV 的遗传稳定性良好,其在雏鸡体内的定殖能力降低,且口服攻毒后,缺失株C79-13ΔssaV对雏鸡半数致死量(LD50)至少是野生株(C79-13)的100倍。以上结果表明,ssaV基因与鸡白痢沙门菌的致病性相关,其缺失会明显降低鸡白痢沙门菌的毒力。
中图分类号: