虎杖转录因子PcMYB1基因的克隆及原核表达

河南农业科学

虎杖转录因子PcMYB1基因的克隆及原核表达

1.长江大学生命科学学院，湖北荆州 434025； 2.长江大学园艺园林学院，湖北荆州 434025

收稿日期:2017-08-20 出版日期:2018-01-15 发布日期:2018-01-15
通讯作者: 许锋(1979-)，男，湖北武汉人，教授，博士，主要从事药用植物次生代谢研究。E-mail:xufeng198@126.com
作者简介:柳忠玉(1978-)，女，湖北潜江人，讲师，博士，主要从事药用植物次生代谢研究。E-mail:zyliu2004@126.com
基金资助:
国家自然科学基金项目（31670608）；长江大学湿地生态与农业利用教育部工程研究中心开放基金项目（KF201511）；长江大学校级大学生创新训练计划项目(2017073)

Received:2017-08-20 Published:2018-01-15 Online:2018-01-15

摘要/Abstract

摘要： 为了探明髓细胞组织增生病毒癌基因同源物（MYB）转录因子在虎杖苯丙烷代谢途径的作用，以虎杖叶片为材料，通过RT-PCR和RACE技术从虎杖中获得MYB转录因子基因，命名为PcMYB1，GenBank登录号为KY495789。序列分析表明，PcMYB1基因的cDNA序列全长1 152 bp，该基因开放阅读框为813 bp，编码270个氨基酸，推测蛋白质分子质量为30.455 ku。PcMYB1编码的氨基酸序列具有MYB类转录因子的共同特征，其N端具有R2、R3两个MYB结构域，同时其 C端还存在一个抑制结构域C2基序pdLNL［D/E］LXI［G/S］。系统进化树分析表明，该基因编码的蛋白质与矮牵牛PhMYB4 的亲缘关系最近。将该基因片段连接到原核表达载体pET-28a中，构建融合表达质粒pET28a-PcMYB1，转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明，表达蛋白与预期大小一致。成功克隆PcMYB1基因的全长序列，构建的原核表达载体pET28a-PcMYB1可用于该基因的功能研究。

关键词: 虎杖, MYB转录因子, PcMYB1, 原核表达, 苯丙烷代谢, RACE

柳忠玉，雷健，李晓筱，刘婵，覃建兵，许锋. 虎杖转录因子PcMYB1基因的克隆及原核表达[J]. 河南农业科学.

[1]	陈甜梦, 蔡彤璇, 王嘉璐, 田牧野, 赵宝华, 刘东. 嗜水气单胞菌外膜蛋白TolB 的原核表达及生物信息学分析[J]. 河南农业科学, 2024, 53(2): 136-143.
[2]	徐佳, 孙怀昌. 牛支原体Vsp 蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备[J]. 河南农业科学, 2023, 52(12): 142-148.
[3]	路庆君, 罗竹星, 刘华伟, 魏梦, 王圆, 张照锋, 李游山. 家蚕丝腺中Abd-A 3 种剪接体的克隆、序列分析及原核表达[J]. 河南农业科学, 2022, 51(4): 138-150.
[4]	简思杰, 晁嘉, 孙薇, 陈锐, 丁锐, 陈琛, 刘祥. 嗜水气单胞菌外膜蛋白AHA1182 的原核表达、纯化与免疫原性研究[J]. 河南农业科学, 2022, 51(11): 135-144.
[5]	耿笑林, 孙杰, 王彦伟, 黄甜, 刘鹏, 曹红梅, 逄文强, 郝丽影, 邓均华, 黄玉欣, 田克恭. 非洲猪瘟病毒K145R 蛋白的原核表达及其单克隆抗体制备[J]. 河南农业科学, 2021, 50(8): 154-159.
[6]	王永红, 王诗瑶. 基于高阶Packet Tracer的温室智能物联网系统仿真研究[J]. 河南农业科学, 2021, 50(6): 156-162.
[7]	王勋, 张雨杭, 孙亚宁, 李青梅, 李鸽, 王丽, 郭军庆, 邓瑞广, 张改平. CRISPR/Cas13a重组蛋白表达纯化及其连带剪切酶活性的鉴定[J]. 河南农业科学, 2021, 50(4): 147-153.
[8]	荣娜, 简思杰, 孙薇, 康超, 陈琛, 刘祥. 鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC的原核表达及抗原性分析[J]. 河南农业科学, 2021, 50(3): 157-164.
[9]	谭政委, 李磊, 余永亮, 许兰杰, 杨红旗, 董薇, 鲁丹丹, 马新明, 梁慧珍. 红花1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶基因CtDXS1的克隆及表达分析 [J]. 河南农业科学, 2021, 50(2): 39-49.
[10]	刘艳阳, 武轲, 梅鸿献, 杜振伟, 崔承齐, 江晓林, 郑永战. 芝麻抗裂蒴基因SiIND1的克隆与原核表达[J]. 河南农业科学, 2020, 49(5): 63-68.
[11]	王雨, 王兆广, 刘泽军, 夏中曦, 范玉顶, 钟其旺. 黄鳝atrogin-1蛋白表达及细胞定位研究[J]. 河南农业科学, 2020, 49(5): 154-160.
[12]	滕蔓, 迟佳琦, 柴书军, 罗俊. 鸡LTBP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 河南农业科学, 2020, 49(12): 144-150.
[13]	李君霞, 代书桃, 陈宇翔, 朱灿灿, 秦娜, 宋迎辉, 王春义, 芮战许, 梁秋芳, 李符, 王生轩. MYB转录因子在植物抗旱基因工程中的应用进展[J]. 河南农业科学, 2020, 49(11): 1-9.
[14]	连凯琪, 周玲玲, 张明亮, 张慢, 王英杰, 林正丹, 宋玉伟. 塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备[J]. 河南农业科学, 2020, 49(1): 123-127.
[15]	张娴, 李超林, 郑乔木, 严子成, 廖海, 周嘉裕. 菜青虫胰凝乳蛋白酶基因PrCT1的克隆及表达分析[J]. 河南农业科学, 2019, 48(9): 74-81.

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