河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (2): 116-119.

• 畜牧·兽医 • 上一篇    下一篇

1型鸭肝炎病毒RT-PCR快速检测方法的建立

王永娟,朱善元,王安平,吴 双,洪伟鸣,左伟勇*   

  1. 江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏 泰州 225300
  • 收稿日期:2016-08-22 出版日期:2017-02-15 发布日期:2017-02-15
  • 通讯作者: 左伟勇(1978-),男,山东泰安人,教授,博士,主要从事动物疫病防控研究。E-mail:979490023@qq.com
  • 作者简介:王永娟(1980-),女,江苏海门人,副教授,博士,主要从事动物传染病防治研究。E-mail:43088591@qq.com
  • 基金资助:
    江苏省高校自然科学研究面上项目(16KJB230004);江苏省“六大人才”高峰资助项目(NY-023,10410015002);江苏农牧科技学院“凤凰人才工程”项目;江苏农牧科技职业学院重点支持项目(NSFZD1405,NSFPT201510,NSFPT201512)

  • Received:2016-08-22 Published:2017-02-15 Online:2017-02-15

摘要: 为建立快速检测临床1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)感染的方法,根据DHAV-1的 vp1基因序列设计1对引物,以DHAV-1及其他常见的感染鸭的病毒基因组为模板,建立了DHAV-1的特异性RT-PCR检测方法;以10倍梯度稀释的DHAV-1 RNA为模板,测定该方法的灵敏度;采集江苏多地的疑似DHAV-1感染病料,提取基因组进行RT-PCR扩增,产物经测序鉴定后判断所建立方法的检测率。结果显示,建立的方法可以特异性扩增DHAV-1 vp1基因保守区360 bp的序列,最低可检测1 fg基因组模板,对临床样品检测率为100%。表明,成功建立了特异性强、灵敏度高且可以用于临床快速诊断DHAV-1感染的方法。

关键词: 鸭, 1型鸭肝炎病毒, 反转录PCR, 检测