黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达

河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (1): 82-85.

黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达

谢茂芳^1,2，薛保国^1*，吴坤^2*

1.河南省农业科学院，河南郑州 450002；2.河南农业大学，河南郑州 450002

收稿日期:2012-08-03 出版日期:2013-01-15 发布日期:2013-01-15
通讯作者: 薛保国（1957-），男，河南驻马店人，研究员，博士，主要从事分子生物学与生物防治研究。E-mail：xuebbb@gmail.com 吴坤（1963-），男，河南驻马店人，教授，博士，主要从事环境微生物研究。E-mail：wukun63@126.com
作者简介:谢茂芳（1985-），女，河南新乡人，在读硕士研究生，研究方向：农业生物技术。E-mail：xmf071541@163.com
基金资助:
科技部“十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAD19B04)

Received:2012-08-03 Published:2013-01-15 Online:2013-01-15

摘要/Abstract

摘要： 根据NCBI上果胶裂解酶（PL）基因在黑曲霉基因组上的分布特点设计特异引物,通过重组PCR扩增出黑曲霉编码PL的结构基因。将PL基因连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-PL,转化大肠杆菌（E.coli）BL21后,用IPTG进行诱导表达。结果表明,PL基因片段序列全长1 431bp,与已知PL基因（XM₀01397206.2）核苷酸和氨基酸序列同源性均为99%。表达产物经12%SDS-PAGE电泳,得到了一条大小约为50kD的条带,与预期分子量相符,证明真菌PL基因在E.coli BL21中可以有效表达。

关键词: 黑曲霉, 果胶裂解酶, 重组PCR, 原核表达

谢茂芳，薛保国，吴坤. 黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达[J]. 河南农业科学, 2013, 42(1): 82-85.

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