河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (6): 92-96.

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昆虫病原细菌Cip蛋白基因工程菌发酵条件的优化

游 娟1,黄建林2,曹 莉3,韩日畴3*   

  1. 1.广东药学院 生物化学与分子生物学系,广东 广州 510006;2.广州计量检测技术研究院,广东 广州 510030; 3.广东省昆虫研究所,广东 广州 510260
  • 收稿日期:2011-11-18 出版日期:2012-06-15 发布日期:2012-06-15
  • 通讯作者: 韩日畴(1963-),男,海南文昌人,研究员,博士,博士生导师,主要从事功能基因 生物农药的基因工程研究。
  • 作者简介:游 娟(1978-),女,湖北洪湖人,讲师,博士,主要从事蛋白质与多肽的生物化学研究。E-mail:youjuan1010@163.com
  • 基金资助:
     广东省自然科学基金重点项目(036692);广东药学院基金项目(2006JCX07)

  • Received:2011-11-18 Published:2012-06-15 Online:2012-06-15

摘要:  昆虫病原发光杆菌属(Photorhabdus)细菌产生的2种胞内晶体蛋白CipA和CipB已在大肠杆菌原核表达系统中进行稳定表达,为进一步提高该蛋白在大肠杆菌中的表达水平,确定工程菌摇瓶培养的最适条件,研究了多种无机离子、装液量、培养基初始pH值、诱导前添加葡萄糖等因素对工程菌摇瓶发酵的影响。结果显示,在发酵培养基中添加10 mmoL/L Mg2+和15 mmoL/LPO43-,调节初始pH值至7.2,装液量为25mL(250mL摇瓶),诱导前添加10g/L葡萄糖时,Cip蛋白的表达量可明显提高,发酵条件优化后CipA和CipB的表达量达到了39%和41%。 

关键词: 昆虫病原细菌, 胞内晶体蛋白, 基因工程菌, 原核表达, 发酵优化, 表达量