河南农业科学 ›› 2023, Vol. 52 ›› Issue (9): 122-132.DOI: 10.15933/j.cnki.1004?3268.2023.09.012
王川艺1,2,黄红涛2,陈发波1,2,郑张飞1,2,方平2
WANG Chuanyi,HUANG Hongtao,CHEN Fabo,ZHEN Zhangfei,FANG Ping
摘要: 为解析RsCHS1基因在胭脂萝卜色素积累中的作用,以胭脂萝卜肉质根肉质cDNA为模板,同源克隆了RsCHS1基因的开放阅读框(ORF),采用生物信息学方法对RsCHS1蛋白的理化性质进行分析。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了RsCHS1基因在胭脂萝卜营养期叶、肉质根肉质和肉质根皮及花期花、荚果和肉质根肉质中的表达情况,同时构建RsCHS1基因过表达载体,异源转化拟南芥,进行RsCHS1基因功能验证。结果表明,克隆得到2个RsCHS1基因,其中RsCHS1-a基因ORF序列长765 bp,编码254个氨基酸;RsCHS1-b基因ORF序列长966 bp,编码321个氨基酸。编码蛋白二、三级结构预测显示,α-螺旋是RsCHS1主要结构元件,β-转角、片层结构、无规则卷曲分布于整个蛋白质中。qRTPCR结果表明,RsCHS1-a基因在肉质根肉质(26.8)、根皮(32.4)和花(6.7)中的相对表达量比叶(1.0)和果实(0.4)中高,RsCHS1-b基因在肉质根肉质(41.4)、根皮(41.9)和花(9.7)中的相对表达量比叶(1.0)和果实(0.6)中高,说明RsCHS1基因具有组织表达特异性。在拟南芥中过表达RsCHS1基因,发现转基因植株叶柄和茎累积大量花青素,表明RsCHS1基因在胭脂萝卜花青素积累中起到重要作用。
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