河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (8): 82-85.

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小麦纹枯病菌原生质体制备条件及再生菌株致病性研究

张 颖1,李 黎1,许玉彬1,王少伟1,王 刚1,2*   

  1. 1.河南大学 生命科学学院,河南 开封 475004; 2.河南大学 生物工程研究所,河南 开封 475004
  • 收稿日期:2014-01-20 出版日期:2014-08-15 发布日期:2014-08-15
  • 通讯作者: 王刚(1971-),男,河南夏邑人,教授,博士,主要从事资源微生物学研究。E-mail:wangg@henu.edu.cn
  • 作者简介:张颖(1979-),女,河南新乡人,实验师,硕士,主要从事资源微生物学研究。E-mail:zhangying03@henu.edu.cn
  • 基金资助:
    河南大学校内科研基金项目(07YBGG011)

  • Received:2014-01-20 Published:2014-08-15 Online:2014-08-15

摘要: 以小麦纹枯病菌HD-6为对象,进行原生质体制备与再生研究,并将再生菌株与原始菌株的致病性进行比较分析,为建立小麦纹枯病菌高效遗传转化体系提供依据。选用溶壁酶、崩溃酶、蜗牛酶、纤维素酶4种常见酶分别对小麦纹枯病菌进行酶解,并通过单因素试验分析酶解温度、酶解时间以及溶液pH值对原生质体得率的影响。结果表明,4种酶均能够裂解小麦纹枯病菌细胞壁得到一定数量的原生质体,其中崩溃酶的裂解效果最好,每克菌丝得到的原生质体数可达到2.6×108个。该酶的最佳反应温度是24℃,最适的酶解时间是3 h,最适的pH值是6.0。获得的原生质体可以完成再生,并且再生菌株与原始菌株的致病力没有显著差异。 

关键词: 小麦纹枯病菌, 原生质体, 再生菌株, 致病性