河南农业科学 ›› 2009, Vol. 38 ›› Issue (2): 103-106.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2009.02.032

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒ORF5基因的克隆与表达

田小辉1,2;王爱萍1;乔松林2;张改平2;肖治军2;冯丽丽2;刘运超1;李乔木1;李卓阳2   

  1. 1郑州大学生物工程系,河南郑州450001;2河南省农业科学院,河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002
  • 出版日期:2009-02-15 发布日期:2009-02-15
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30730068)

  • Published:2009-02-15 Online:2009-02-15

摘要: 用RT—PCR方法从河南分离的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)变异株(HN07—1)中扩增ORF5全长基因,将其克隆至pMD19-T载体。测序结果表明,该序列与标准美洲株VR-2332同源性为89%,与我国早期分离的BJ-4株同源性为88%,与HB-1、JXAI变异株同源性为96%和99%。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达。SDS—PAGE和Western—Blot结果表明,成功表达了41.5kD的融合蛋白。

关键词: 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒, 变异株, ORF5, 原核表达

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