河南农业科学 ›› 2009, Vol. 38 ›› Issue (1): 91-99 .DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2009.01.026

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韭菜ISSR-PCR反应体系的优化

李延龙;张明;曹秀敏;张伟;王利亚;   

  1. 平顶山市农业科学院;
  • 出版日期:2009-01-15 发布日期:2009-01-15

  • Published:2009-01-15 Online:2009-01-15

摘要: 通过优化韭菜ISSR-PCR反应的主要参数,确定韭菜ISSR反应体系和扩增条件及引物适宜的退火温度。结果表明,10μL反应体积中,各主要成分的添加剂量分别为:10×Buffer1μL,20ng/μL的模板DNA1μL,0.6mmol/L引物3.3μL,10mmol/L的dNTP0.4μL,25mmol/L的MgCl20.5~0.6μL,2.5U/μL的Taq酶0.2μL,双蒸水3.5~3.6μL。引物适宜的退火温度均高于其Tm值2~4℃。

关键词: 韭菜, ISSR, PCR, 反应体系

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