河南农业科学 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (4): 145-149.

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基于免疫分析的杏仁蛋白饮料中杏仁蛋白质定量方法研究

张世伟1,赖心田1*,王士峰1,黄静敏1,冯荣虎1,谭贵良2,刘 垚2,杨国武1   

  1. 1.深圳市计量质量检测研究院,深圳 518102; 2.广东省中山市质量计量监督检测所,广东 中山 528403
  • 收稿日期:2015-10-13 出版日期:2016-04-15 发布日期:2016-04-15
  • 通讯作者: 赖心田(1975-),男,福建龙岩人,高级工程师,博士,主要从事食品质量安全研究。E-mail:lxintian@163.com
  • 作者简介:张世伟(1985-),男,江西新余人,高级工程师,硕士,主要从事食品质量安全研究。E-mail:zsw_8506@163.com
  • 基金资助:
    国家质检总局科技计划项目(2013QK274);广东省质量技术监督局科技计划项目(2013CZ05)

  • Received:2015-10-13 Published:2016-04-15 Online:2016-04-15

摘要: 为建立基于竞争酶联免疫分析(ELISA)的杏仁蛋白饮料中杏仁蛋白质定量方法,使用2-D电泳结合MALDI-TOF/ MS鉴定了杏仁的高丰度蛋白,分离纯化了杏仁40 ku prunin蛋白α链,并以此作为抗原制备了抗杏仁蛋白单克隆抗体,使用该抗体建立了检测杏仁蛋白质的竞争酶联免疫〖JP2〗分析方法。该方法以杏仁可溶全蛋白作为标准品,IC50为19.6 μg/mL,线性范围为5.0~100 μg/mLR2=0.990)。该方法特异性良好,和其他可食种子蛋白质无交叉反应。检测植物蛋白饮料样品的检出限为0.6 mg/mL,相对标准偏差<10%。使用巴氏杀菌、超高温瞬时灭菌和高压灭菌的蛋白质平均回收率分别为96%、92%和81%。

 

关键词: 杏仁, 蛋白饮料, ELISA, 定量