河南农业科学 ›› 2007, Vol. 36 ›› Issue (12): 35-39.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2007.12.009

• 作物栽培·遗传育种 • 上一篇    下一篇

虾青素合成关键酶基因bkt和CrtR-B双价植物表达载体的构建及对花生的遗传转化

徐静;杨庆利;檀琮萍;侯艳华;禹山林;秦松;   

  1. 淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室,山东省花生研究所,中国科学院海洋研究所,中国科学院海洋研究所,山东省花生研究所,中国科学院海洋研究所 江苏连云港222005,中国科学院海洋研究所,山东青岛266071,山东青岛266100,山东青岛266071,山东青岛266071,山东青岛266100,山东青岛266071
  • 出版日期:2007-12-15 发布日期:2007-12-15
  • 基金资助:
    国家“863”项目(2004AA241150);青岛市自然科学基金项目(05-1-JC-92)

  • Published:2007-12-15 Online:2007-12-15

摘要: 虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素,具有广泛的应用价值。β-胡萝卜素酮化酶(BKT)和β-胡萝卜素羟化酶(CrtR-B)是虾青素的生物合成途径中的两个关键酶。采用LaTaqDNA聚合酶用PCR的方法分别从pET-28a(+)-bkt,pET-28a(+)-CrtR中扩增得到bkt和CrtR-B基因,用bkt基因替换pBI221中的GUS基因形成含有CaMV 35S启动子和NOS终止子的bkt基因表达盒,然后插入植物表达载体pCAMBIA1301的多克隆位点,再用CrtR-B基因替换pCAMBIA1301中的另一个GUS基因,形成CrtR-B基因表达盒,最终获得带有抗性基因的双价植物表达载体pCAMBIA1301-bkt-CrtR。通过农杆菌EHA105介导将其转入花生(花育23),获得了经卡那霉素筛选的抗性植株,通过PCR扩增验证,花生基因组中含有这两个基因。

关键词: 虾青素, bkt基因, CrtR-B基因, 载体构建, 花生

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