河南农业科学 ›› 2006, Vol. 35 ›› Issue (6): 36- .DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2006.06.010

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甘蓝型油菜Δ~(12)-油酸去饱和酶基因RNAi载体的构建

梁会娟;苗丽娟;曹刚强;田保明;陈占宽;   

  1. 郑州大学生物工程系,河南省农业科学院生物技术研究所,郑州大学生物工程系,郑州大学生物工程系,河南省农业科学院生物技术研究所 河南郑州450001,河南郑州450002,河南郑州450001,河南郑州450001,河南郑州450002
  • 出版日期:2006-06-15 发布日期:2006-06-15

  • Published:2006-06-15 Online:2006-06-15

摘要: 通过基因工程手段抑制甘蓝型油菜Δ12-油酸去饱和酶(delta-12 oleate desaturase FAD2)基因的表达,从而使油酸脱饱和产生亚油酸的步骤受阻,达到富集油酸,减少多不饱和脂肪酸含量的最终目的。依据植物RNA干扰的原理和研究中用于构建RNAi载体的基本经验,选择油菜fad2基因片段(510bp)分别以反向和正向的形式插入到油菜napin启动子下游,并在反向和正向插入的基因片段之间即间隔区导入1个来源于豌豆的rbcS-3C基因内含子(83bp)及其剪切位点之前5bp、之后4bp片段。组装完成的fad2RNAi载体转入到植物双元表达载体pCAMBIA3301,植物筛选标记基因采用抗灭生性除草剂PPT的选择基因bar及报告基因gus,从而构建成以甘蓝型油菜fad2基因为靶标的RNAi植物表达载体pCAMBIA3301-fad2i。

关键词: 油菜, 油酸, fad2, RNAi, 载体构建

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