河南农业科学 ›› 2015, Vol. 44 ›› Issue (11): 137-140.

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NTG诱变筛选赖氨酸缺陷型大肠杆菌

翟玉洁1,姜军坡1,王 迈2,杜国霞2,王世英1*   

  1. 1. 河北农业大学 生命科学学院, 河北 保定 071001; 2. 石家庄市动物卫生监督所,河北 石家庄 050000
  • 收稿日期:2015-06-10 出版日期:2015-11-15 发布日期:2015-11-15
  • 通讯作者: 王世英(1963-),男,河北省安平人,教授,本科,主要从事农牧微生物学研究。E-mail:wsy99999@126.com
  • 作者简介:翟玉洁(1990-),女,河北省保定人,在读硕士研究生,研究方向:新型饲用益生菌。E-mail:zhaiyujie901118@126.com
  • 基金资助:
     
    河北农业大学大学生科技创新重点扶持计划项目(20142d010);石家庄市科学技术研究与发展计划项目(151500062A)

  • Received:2015-06-10 Published:2015-11-15 Online:2015-11-15

摘要: 为了获得产赖氨酸益生菌所需的指示菌株,以大肠杆菌(E.coli)野生型为出发菌株,用0.25 mg/mL的亚硝基胍(NTG)进行诱变,采用青霉素浓缩法淘汰野生型菌株,采用点植对照法在基本培养基(MM)和赖氨酸补充培养基([Lys])上对赖氨酸营养缺陷型(Lys-E.coli进行初筛,再采用划线对照法在MM和[Lys]上对Lys-疑似菌株进行复检,[Lys]斜面5次传代后,采用划线对照法检测Lys-菌株遗传稳定性。结果表明,0.25 mg/mL NTG处理菌液40 min,对应的致死率为82.4%,经初筛和复检后获得4株Lys-菌株,其中L-3和L-5菌株经5次传代后仍为Lys-菌株,Lys-菌株的检出率为2.70%。

关键词: 亚硝基胍, 大肠杆菌, 赖氨酸, 营养缺陷型, 筛选