河南农业科学 ›› 2018, Vol. 47 ›› Issue (8): 128-133.

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降解黄曲霉毒素B1菌株的筛选及毒素降解酶的分离

左瑞雨1,2,尹清强2*,常 娟2,刘洪兵3,王二柱4,朱 群4   

  1. (1.河南省畜牧总站,河南 郑州 450008; 2.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002; 3.泌阳县畜牧局,河南 泌阳 463700; 4.河南德邻生物制品有限公司,河南 新乡 453000)
  • 收稿日期:2018-02-28 出版日期:2018-08-15 发布日期:2018-08-15
  • 通讯作者: 尹清强(1964-),男,河南南阳人,教授,主要从事动物营养与生物工程研究。E-mail:qqy1964@126.com
  • 作者简介:左瑞雨(1982-),男,河南南阳人,高级畜牧师,博士,主要从事动物营养与养殖技术推广。E-mail:zuoruiyu@126.com
  • 基金资助:
    郑州市科技创新团队项目(112PCXTD339)

  • Received:2018-02-28 Published:2018-08-15 Online:2018-08-15

摘要: 为了筛选具有降解黄曲霉毒素B1(AFB1)作用的菌株,并分离纯化高效AFB1降解酶,以AFB1作为降解AFB1菌株生长的能源和碳源进行初筛,将初筛得到的菌株接种于含有AFB1的培养基中,选择降解率最高的菌株进行固体发酵培养后提取粗酶液,通过硫酸铵分级沉淀和葡聚糖凝胶对降解AFB1的活性物质进行分离,SDS-PAGE蛋白质电泳检测降解酶蛋白质分子质量大小,并通过酶联免疫法测定不同分子质量的酶蛋白对AFB1的降解率,26S rDNA和同源序列分析对降解率最高的菌株进行菌种鉴定。结果显示,降解AFB1能力最高的菌株为Y8,降解率为77.05%,凝胶层析分离出的31.7 ku的酶蛋白对AFB1的降解率达54.33%;菌种鉴定结果表明,真菌Y8为米曲霉。综上,筛选的米曲霉Y8能够高效降解AFB1,可有效缓解黄曲霉毒素对畜禽的危害,具有提高养殖效益的潜在应用价值。

关键词: 黄曲霉毒素B1, 筛选, 降解酶, 凝胶层析, 鉴定, 米曲霉