仓储片烟中优势霉菌的分离鉴定及其霉变挥发性代谢产物研究

doi:10.15933/j.cnki.1004-3268.2023.03.011

摘要/Abstract

摘要： 为建立仓储过程中片烟霉变的快速判别方法，通过纯培养和18S rDNA测序对仓储霉变片烟中的霉菌进行分离、纯化和鉴定，将优势霉菌进行致霉性试验，利用气相色谱离子迁移谱（GC-IMS）分析片烟在优势霉菌不同侵染时期挥发性组分的差异。结果表明，烟叶样品中根霉数量最多，其次是曲霉，再次是毛霉和青霉，优势霉菌为米根霉。致霉性试验表明，米根霉有一定的致霉性。将米根霉接种烟叶进行人工污染，在35 ℃、相对湿度70%的条件下，经18 d培养，霉菌数量达到5.0×104 cfu/mL，片烟发生轻度霉变。经GC-IMS分析，共定性识别出42种特征挥发性化合物，其中1-辛烯-3-酮、3-辛酮、2-呋喃甲硫醇、松油醇、正辛醇、3-乙基-苯丙酸、戊酸、蒎烯这8种化合物含量在米根霉侵染阶段明显降低，顺式-3-己烯-1-醇、丁酸甲酯、2-戊酮、乙基丙酸这4种化合物含量在片烟发生轻度霉变时明显升高，可作为仓储片烟霉变的潜在标识分子。

关键词: 片烟, 霉菌, 霉变预测, 气相色谱离子迁移谱, 快速检测

Abstract: To establish a rapid identification method for tobacco mildew during storage，pure culture and 18S rDNA sequencing were used to isolate，purify and identify the molds in warehouse moldy pieces of tobacco. The dominant mold was tested for mildew.The differences of volatile components in tobacco strips during different infection periods of the dominant mold were analyzed by gas chromatography‑ion mobility spectrometry（GC‑IMS）.It was found that Rhizopus was the most abundant in tobacco leaf samples，followed by Aspergillus，Mucor and Penicillium.Further identification showed that Rhizopus oryzae was the dominant mold in tobacco leaves.The mildew experiment showed that Rhizopus oryzae had certain mildew ability.Tobacco leaves were inoculated with Rhizopus oryzae for artificial contamination.After 18 days of culture at 35℃ and 70% relative humidity，the amount of Rhizopus oryzae reached 5.0×104 cfu/mL，and mild mildew occurred in the tobacco leaves，and 42 characteristic volatile compounds were identified. Among them，the concentrations of 1‑octene‑3‑one，3‑octanone，2‑furan methanethiol，alpha‑terpineol，1‑octanol，3‑ethyl‑phenylpropanoate，pentanoic acid，and alpha‑pinene decreased significantly during the infection stage of Rhizopus oryzae，the concentrations of（Z）‑3‑hexen‑1‑ol，methyl butanoate，2‑pentanone，and hexyl propionate increased significantly in the mildew stage of tobacco，which could be used as potential labeling molecules for mold in tobacco strips.

Key words: Tobacco, Mold, Mildew prediction, Gas chromatography?ion mobility spectrometry（GC?IMS）, Rapid test

中图分类号:

TS45
S572

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