河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (3): 31-35.

• 作物栽培 遗传育种 • 上一篇    下一篇

高质量花生根尖细胞染色体制片方法研究

杜培,张新友*,李丽娜,黄冰艳,易明林,董文赵,汤丰收   

  1. 河南省农业科学院 经济作物研究所,农业部黄淮海油料作物重点实验室,河南省油料作物遗传改良重点实验室,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2012-12-08 出版日期:2013-03-15 发布日期:2013-03-15
  • 通讯作者: 张新友(1963-),男,河南太康人,研究员,博士,主要从事花生遗传育种研究。E-mail:haasz@126.com
  • 作者简介:杜培(1983-),男,河南临颍人,研究实习员,硕士,主要从事花生细胞生物学及远缘杂交研究。E-mail:dupei2005@163.com
  • 基金资助:
    河南省重大科技专项(111100110200);国家科技支撑计划(2011BAD35B04);国家花生产业技术体系建设项目(CARS-14)

  • Received:2012-12-08 Published:2013-03-15 Online:2013-03-15

摘要: 为了能快速获得用于染色体分带或者荧光原位杂交的高质量花生根尖细胞染色体制片,通过选择适当粗细的花生侧根,经过对二氯苯浸泡预处理,卡诺氏固定液固定后,直接用45%醋酸烘烤压片,得到了细胞平整、染色体分散的根尖细胞染色体制片。与HCl解离压片的方法相比,该方法中试剂对染色体影响微小。与酶解去壁低渗法相比,该方法没有酶解去壁低渗的过程,不需要用果胶酶和纤维素酶等较贵重试剂,节约了时间和成本,提高了制片效率。该方法不仅适用于花生,也适用于芝麻、水稻、玉米、大豆、青豆、番茄等多种植物。 

关键词: 花生, 根尖细胞, 染色体, 醋酸烘烤, 制片方法, DAPI染色