河南农业科学 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (1): 124-126.

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鸭新城疫病毒M基因的原核表达与多抗制备

王安平,朱善元*,吴 双,王永娟,左伟勇,洪伟鸣   

  1. 江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏 泰州 225300
  • 收稿日期:2015-07-02 出版日期:2016-01-15 发布日期:2016-01-15
  • 通讯作者: 朱善元(1968-),男,江苏泰州人,教授,博士,主要从事分子生物学方面的研究。E-mail:jstzzsy@126.com
  • 作者简介:王安平(1980-),女,江苏泰州人,副教授,博士,主要从事兽用生物制药方面的研究。E-mail:wap4017@163.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31302096);江苏省农业支撑项目(BE2013415);江苏省六大人才高峰项目(NY-009)

  • Received:2015-07-02 Published:2016-01-15 Online:2016-01-15

摘要: 为制备鸭源新城疫病毒M蛋白的多克隆抗体,根据鸭新城疫病毒M基因序列设计1对特异性引物,RT-PCR方法扩增出M基因,克隆入原核表达载体pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下成功表达重组蛋白,SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白分子质量约为39 ku。将目的蛋白切胶免疫ICR小鼠,制备重组蛋白的多抗血清,Western blot分析显示,制备的多抗血清能与鸭新城疫病毒感染的SPF鸡胚尿囊液总蛋白发生特异反应。以上结果表明,M基因在大肠杆菌中获得了成功表达,且制备的鼠多抗血清可以用于M蛋白的检测。

关键词: 鸭新城疫病毒,  , M基因,  , 原核表达,  , 多抗