河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (5): 56-60.

• 作物栽培 遗传育种 • 上一篇    下一篇

抗虫转CpTI基因植物定性PCR检测技术的建立

朱 珠,王 永*,兰青阔,赵 新,余景会,郭永泽,程 奕   

  1. 天津市农业科学院 中心实验室,天津 300381
  • 收稿日期:2011-10-31 出版日期:2012-05-15 发布日期:2012-05-15
  • 通讯作者: 王 永(1977-),男,天津人,副研究员,硕士,主要从事农产品安全质量分子检测研究。E-mail:wyzl2007@yahoo.com.cn
  • 作者简介:朱 珠(1963-),女,四川自贡人,助理研究员,主要从事转基因生物分子检测技术研究。E-mail:zz63@sina.com
  • 基金资助:
     科技部国际合作项目(2006DFA32380)

  • Received:2011-10-31 Published:2012-05-15 Online:2012-05-15

摘要: 为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退火温度为58℃,引物浓度为0.4μmol/L较好,该方法能够特异性检测样品中CpTI基因,检测灵敏度达0.05%(质量比)。该方法符合农业转基因生物产品成分检测标准对特异性、灵敏度、重复性的要求,可为抗虫转CpTI基因植物生物安全管理提供技术支撑。 

关键词: 豇豆胰蛋白酶抑制剂, 基因特异性检测, 定性PC