河南农业科学 ›› 2025, Vol. 54 ›› Issue (12): 62-69.DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2025.12.007

• 作物栽培·遗传育种 • 上一篇    下一篇

金线莲类原球茎生物反应器培养体系的建立

章方玲1，孔向军1，周小军1，王红珍2，吴梅1，方莉1   

  1. （1.金华市农业科学研究院，浙江 金华 321017；2.浙江农林大学 食品与健康学院/浙江省特色中药资源保护与创新利用重点实验室，浙江 杭州 311300）
  • 收稿日期:2025-07-28 接受日期:2025-09-17 出版日期:2025-12-15 发布日期:2025-12-12
  • 通讯作者: 方莉（1976-），女，浙江金华人，高级农艺师，主要从事金线莲目标品种选育及高效配套技术研究。E-mail：412265740@qq.com
  • 作者简介:章方玲（1996-），女，安徽安庆人，硕士，主要从事中药理论与应用研究。E-mail：fangzhang1112@163.com
  • 基金资助:
    浙江省科技重大项目（农业新品种选育专项子课题）（2021C02074-4-3）；金华市科技局农业重大科研项目（2022-2-009，2023-2-2005）

Establishment of a Bioreactor Culture System for Anoectochilus roxburghii Protocorm⁃Like Bodies

ZHANG Fangling1，KONG Xiangjun1，ZHOU Xiaojun1，WANG Hongzhen2，WU Mei1，FANG Li1   

  1. （1.Jinhua Academy of Agricultural Sciences，Jinhua 321017，China；2.College of Food and Health/Zhejiang Key Laboratory for Chinese Medicinal Resources Protection and Innovative Utilization，Zhejiang A & F University，Hangzhou 311300，China）
  • Received:2025-07-28 Accepted:2025-09-17 Published:2025-12-15 Online:2025-12-12

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摘要： 筛选金线莲类原球茎（Protocorm⁃like bodies，PLBs）诱导的最佳激素配比和种源，探究接种量与培养时间对PLBs生物量及金线莲苷含量的影响，以优化金线莲PLBs规模化培养条件。以金线莲组培苗为试材，测试不同质量浓度6-苄基氨基嘌呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）、玉米素（ZT）和2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）组合对5种金线莲PLBs诱导的影响，比较不同种源PLBs诱导率、金线莲苷含量及增殖特征；利用植物生物反应器，研究接种量（20~80 g/L）和培养时间（10~40 d）对生物量及金线莲苷合成的影响。结果表明，MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.8 mg/L ZT+0.2 mg/L 2，4-D培养基组合提高不同种金线莲不定芽诱导率效果最佳。同等培养条件下，ZY1（福建南靖）种源的PLBs诱导率（93%）、金线莲苷含量（5.03%）及径向增殖能力均优于其他种源。在生物反应器培养系统中，接种量60 g/L、暗光培养40 d时，金线莲PLBs增殖系数（1.46）和金线莲苷含量（7.80%）均达到峰值。综上，利用ZY1优势种源，基于MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.8 mg/L ZT+0.2 mg/L 2，4-D培养基，结合接种量60 g/L、暗光培养40 d的生物反应器培养条件，可实现金线莲类原球茎生物量与金线莲苷含量的高效积累。

关键词: 金线莲, 类原球茎, 生物反应器, 金线莲苷

Abstract: To screen the optimal hormone combination and germplasm for inducing Anoectochilus roxburghii protocorm⁃like bodies（PLBs），and to investigate the effects of inoculum density and culture duration on PLBs biomass and kinsenoside content for optimizing large⁃scale culture conditions，this study utilized tissue⁃cultured seedlings of Anoectochilus roxburghii.The effects of different concentration combinations of 6⁃benzylaminopurine（6⁃BA），1⁃naphthaleneacetic acid（NAA），zeatin（ZT），and 2，4⁃dichlorophenoxyacetic acid（2，4⁃D） on the induction of PLBs from five different Anoectochilus roxburghii germplasms were tested.The PLB induction rate，kinsenoside content，and proliferation characteristics were compared among the different plant germplasms.Using a plant bioreactor，the influence of inoculum density（20—80 g/L） and culture duration（10—40 days） on biomass and kinsenoside synthesis was studied.The results indicated that the combination of MS+3 mg/L 6⁃BA+0.5 mg/L NAA+0.8 mg/L ZT+0.2 mg/L 2，4⁃D medium had the best effect on improving the induction rate of adventitious buds of different species of Anoectochilus roxburghii germplasms.Under identical culture conditions，the ZY1（Nanjing，Fujian） germplasm demonstrated superior PLB induction rate（93%），kinsenoside content（5.03%），and radial proliferation capacity compared to other germplasms.In the bioreactor culture system，both the proliferation coefficient（1.46）and kinsenoside content（7.80%）of the PLBs peaked at an inoculum density of 60 g/L after 40 days of culture in darkness.In conclusion，utilizing the superior ZY1 germplasm with the MS+3 mg/L 6⁃BA+0.5 mg/L NAA+0.8 mg/L ZT+0.2 mg/L2，4⁃D medium，combined with bioreactor culture conditions of 60 g/L inoculum density and 40 days of culture in darkness，enables the highly efficient accumulation of both Anoectochilus roxburghii PLB biomass and kinsenoside content.

Key words: Anoectochilus roxburghii, Protocorm?like body, Bioreactor, Kinsenoside

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