农杆菌介导 BtCry1Ac、NTHK1双价基因转化烟草植株的研究

河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (7): 31-37.

农杆菌介导 BtCry1Ac、NTHK1双价基因转化烟草植株的研究

河北农业大学，河北保定 071001

收稿日期:2014-01-20 出版日期:2014-07-15 发布日期:2014-07-15
通讯作者: 王进茂（1969-），男，河北深县人，教授，博士，主要从事植物生物技术与抗逆性研究。E-mail：swjs224@aliyun.com
作者简介:杜沙沙（1987-），女，河北安国人，在读硕士研究生，研究方向：植物基因工程育种。E-mail：wqhdushasha@sina.com
基金资助:
国家高技术研究发展计划“863”计划项目（2011AA100201）；国家自然科学基金项目（31370663）

Received:2014-01-20 Published:2014-07-15 Online:2014-07-15

摘要/Abstract

摘要： 摘要：为探讨多基因植物转化载体ｐ０９６８９９中外源基因ＢｔＣｒｙ１Ａｃ和ＮＴＨＫ１在转基因植株中的表达情况，通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法转化野生烟草，经卡那霉素筛选，初步获得了１０株转基因烟草植株。经ＰＣＲ鉴定证明目的基因已被整合到烟草基因组中。利用荧光定量ＰＣＲ和
ＥＬＩＳＡ分析目的基因在转录水平和翻译水平的表达量并对转基因烟草株系进行了抗虫试验和耐盐性试验。结果表明，目的基因在转录水平和翻译水平分别得到表达，但表达量存在差异，其中２号转基因株系毒蛋白表达量最高，其含量达可溶性总蛋白的0.0285%；饲虫试验中，部分转基因烟草株系对斜纹夜蛾的毒杀作用明显高于未转化烟草，其中２号转基因株系的抗虫性最高，饲喂第６天斜纹夜蛾幼虫死亡率达到75.56%，与Ｂｔ毒蛋白表达量相一致；在盐胁迫下，转基因烟草的叶片生长状况均好于对照（非转基因）烟草的生长。证明ＢｔＣｒｙ１Ａｃ基因和ＮＴＨＫ１基因的转入在定程度上提高了烟草的抗虫性和耐盐能力。

关键词: 烟草, , BtCry1Ac基因, NTHK1基因, 抗虫性, 耐盐性

杜沙沙，张旭，王进茂，董研，杨敏生. 农杆菌介导 BtCry1Ac、NTHK1双价基因转化烟草植株的研究[J]. 河南农业科学, 2014, 43(7): 31-37.

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