河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (5): 110-113.

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丝状真菌转化载体的改进

李继刚,陈永利,杨忠祥,郑建坡   

  1. 河北大学 生命科学学院,河北省微生物多样性研究与应用实验室,河北 保定 071002
  • 收稿日期:2012-11-07 出版日期:2013-05-15 发布日期:2013-05-15
  • 作者简介:李继刚(1974-),男,山东胶南人,副教授,博士,主要从事基因工程研究。E-mail:lijigang@mail.hbu.edu.cn
  • 基金资助:
     河北省科技支撑计划项目(11215529);河北省重点实验室开放课题(09265631D-11)

  • Received:2012-11-07 Published:2013-05-15 Online:2013-05-15

摘要: 为了改进农杆菌介导丝状真菌遗传转化用的Ti双元载体,将质粒pUCATPH上真菌trpC基因启动子驱动的潮霉素B抗性基因(hygB)表达盒转移到Ti质粒pPZP111上,构建成用于丝状真菌遗传转化的Ti载体pATZ。将植物表达载体pDL916上的草丁膦抗性bar基因重组到载体pKS-trpC上,构建成含真菌启动子、终止子调控的bar基因表达盒的中间载体pTrpCBar;之后将该表达盒转移到pPZP111载体上,得到以bar基因为筛选标记的真菌转化Ti质粒pTBZ。上述质粒载体经酶切鉴定和DNA测序证实构建正确,为丝状真菌的农杆菌介导遗传转化提供了新的工具。 

关键词: 农杆菌介导转化, 丝状真菌, 转化载体, 草丁膦抗性基因bar, 潮霉素B抗性基因hygB