河南农业科学 ›› 2011, Vol. 40 ›› Issue (6): 115-117,121.

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蝴蝶兰ACC 氧化酶和ACC 合成酶融合反义表达载体的构建

王宇腾1 , 崔波2, 蒋素华2, 武思1, 牛苏燕1, 叶永忠1*   

  1.  1. 河南农业大学 生命科学学院, 河南 郑州 450002; 2. 郑州师范学院 生物工程研究所, 河南 郑州 450044
  • 收稿日期:2010-12-30 出版日期:2011-06-15 发布日期:2011-06-15
  • 通讯作者: 叶永忠(1957-),男,湖北黄梅人,教授,博士生导师,主要从事植物学的研究与教学工作。E-mail:yeyzh@163.com
  • 作者简介:王宇腾(1984-),男,河南漯河人,在读硕士研究生,研究方向:植物分子生物学与生物技术。E-mail:yet010@163.com
  • 基金资助:
    河南省科技攻关项目(0524050005)

  • Received:2010-12-30 Published:2011-06-15 Online:2011-06-15

摘要: 为了获得具有超常花期的蝴蝶兰新品系,根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,设计引物从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2个基因的克隆和测序后,将ACS基因片段和ACO基因片段以反义的方向插入到中间载体pBI221 CaMV启动子的下游,酶切后获得含有CaMV启动子的ACS和ACO基因的反义融合片段。将此包含启动子的反义融合片段连接到植物表达载体pCAM-BIA3301中,获得ACC合成酶基因和ACC氧化酶基因融合的反义表达载体,将构建好的植物表达载体转化农杆菌LBA4404,用于侵染蝴蝶兰原球茎。

关键词:  , 蝴蝶兰, ACC氧化酶, ACC合成酶, 融合反义基因, 根癌农杆菌