河南农业科学 ›› 2010, Vol. 39 ›› Issue (11): 112-115.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.11.030

• • 上一篇    下一篇

支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定

赵战勤1;薛云1;裴洁2;王臣1;丁轲1;程相朝1   

  1. 1河南科技大学动物科技学院动物病原微生物实验室,河南洛阳471003;2湖北省动物疫病预防控制中心,湖北武汉430064
  • 出版日期:2010-11-15 发布日期:2010-11-15
  • 基金资助:
    国家863计划(2006AA10A206); ;河南科技大学创新培育基金项目(2009CZ0010)

  • Published:2010-11-15 Online:2010-11-15

摘要: 通过PCR扩增获得支气管败血波氏杆菌的全长4 395 bpdnt基因,并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western-blot检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白HIS6-DNT。在乳鼠皮肤坏死试验中,表达产物HIS6-DNT和天然DNT均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中,兔抗HIS6-DNT血清能中和天然DNT,使其失去对乳鼠皮肤的坏死毒性。试验结果表明,重组蛋白具有天然DNT的生物学毒性和免疫原性,所产生的抗体具有中和活性,为DNT的结构和功能研究奠定了基础。

关键词: 支气管败血波氏杆菌, 皮肤坏死毒素, dnt基因, 表达

中图分类号: