河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (4): 124-127.

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PCR检测兔支气管败血波氏杆菌方法的建立及应用

马超锋1,陈 铭1,徐永杰2*   

  1. 1.信阳市动物疫病预防控制中心,河南 信阳464000; 2.信阳师范学院 生命科学学院,河南 信阳 464000
  • 收稿日期:2016-11-20 出版日期:2017-04-15 发布日期:2017-04-15
  • 通讯作者: 徐永杰(1980-),男,河南商城人,副教授,博士,主要从事动物遗传学研究。E-mail:13523899902@126.com
  • 作者简介:马超锋(1981-),男,河南禹州人,高级兽医师,硕士,主要从事动物疫病防控。E-mail:machaofeng5@163.com
  • 基金资助:
    河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(2015GGJS-139)

  • Received:2016-11-20 Published:2017-04-15 Online:2017-04-15

摘要:

为建立准确、快速检测兔支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)的PCR方法,根据GenBank中波氏杆菌ptxA基因设计1对特异性引物,用建立的PCR方法扩增兔波氏杆菌,可扩增出870 bp的目的片段。该方法特异性好,仅对波氏杆菌有特异性的扩增,而对大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌等病原菌的扩增结果呈阴性;敏感性较高,最低检测限可达6.8×10-7 μg/mL;用建立的PCR方法检测临床疑似感染支气管败血波氏杆菌病兔的脏器及鼻拭子样品,可扩增出目的条带,且与细菌分离的结果一致。可见,建立的检测方法敏感、特异,可用于临床上兔波氏杆菌病的快速诊断及鉴定。

关键词: 兔波氏杆菌, PCR, ptxA基因