河南农业科学 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (2): 105-110.

• 畜牧·兽医 • 上一篇    下一篇

O型口蹄疫病毒VP0和VP1蛋白的可溶性表达与反应原性分析

赵宝磊1,刘运超2,陈玉梅2,姬鹏超2,王聚财1,刘 畅2,杨素珍2,张改平1,2*   

  1. 1.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002;2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2016-09-06 出版日期:2017-02-15 发布日期:2017-02-15
  • 通讯作者: 张改平(1960-),男,河南内黄人,研究员,博士,主要从事动物疫病免疫机制与疫苗研究。E-mail:zhanggaiping2003@163.com
  • 作者简介:赵宝磊(1990-),男,河南许昌人,在读硕士研究生,研究方向:动物疫病与疫苗。E-mail:baoleizhao2010@163.com
  • 基金资助:
    国家重点研发计划项目(2016YFD0500704);河南省基础与前沿技术研究计划项目(152300410238);河南省科技创新基础前瞻类项目(20141644);河南省重大科技专项(141100110100)

  • Received:2016-09-06 Published:2017-02-15 Online:2017-02-15

摘要: 为了高效可溶性表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP0、VP1结构蛋白,根据大肠杆菌密码子的偏爱性优化合成VP0和VP1基因片段,并将其克隆到pE-SUMO载体中,构建重组质粒SUMO-VP0和SUMO-VP1,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,并优化诱导温度、时间和IPTG浓度等表达条件。结果显示, SUMO-VP0可溶性蛋白表达的最佳条件为:20 ℃条件下,0.1 mmol/L IPTG诱导表达8 h;SUMO-VP1可溶性蛋白表达的最佳条件为:37 ℃条件下,0.1 mmol/L IPTG诱导表达12 h。 SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明,表达的SUMO-VP0、SUMO-VP1可溶性蛋白能够被抗FMDV的阳性血清识别,具有很好的反应原性。

关键词: 口蹄疫病毒, VP0、VP1结构蛋白, 可溶性表达, SUMO标签