河南农业科学 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (6): 104-110.

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蝴蝶兰液泡型ATP酶E亚基基因的克隆及序列分析

袁秀云1,田云芳2,梁 芳1,蒋素华1,许申平1,王默霏1,崔 波1*   

  1. 1.郑州师范学院 生物工程研究所,河南 郑州 450044; 2.郑州师范学院 生命科学学院,河南 郑州 450044
  • 收稿日期:2016-01-20 出版日期:2016-06-15 发布日期:2016-06-15
  • 通讯作者: 崔 波(1962-),男,河南泌阳人,教授,博士,主要从事花卉育种研究。 E-mail:laocuibo@163.com
  • 作者简介:袁秀云(1970-),女,河南许昌人,教授,博士,主要从事植物生物技术研究。E-mail:yuanxiuyun@163.com
  • 基金资助:
    河南省科技攻关项目(092102110128)

  • Received:2016-01-20 Published:2016-06-15 Online:2016-06-15

摘要:  E亚基是液泡型ATP 酶(V-ATPase)多亚基复合体的重要组成部分,响应植物的非生物胁迫,对其基因的克隆及分析有助于阐释其逆境条件下的分子调节机制。根据蝴蝶兰低温诱导差异蛋白的序列设计简并引物,利用RT-PCR和RACE技术从蝴蝶兰叶片中克隆获得2条V-ATPase E亚基的cDNA序列,分别命名为PhVHA-EaPhVHA-Eb,GenBank登录号分别为KT758849和KT758850。PhVHA-Ea和PhVHA-Eb全长分别为960 bp和1 036 bp,二者均具有687 bp的开放阅读框,编码228个氨基酸,包含相同的vATP-synt_E保守域;生物信息学分析表明,2个序列编码蛋白具有相似的二级结构和相同的亲水性,预测的三级结构也相同。系统进化树分析显示,蝴蝶兰PhVHA-Ea和PhVHA-Eb与单子叶植物液泡型ATP 酶E亚基距离最近。

关键词:  , 蝴蝶兰,  , 液泡型ATP 酶,  , E亚基,  , RACE,  , 序列分析