河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (6): 132-136.

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利用16S rDNA检测奶牛乳房炎5种病原菌PCR方法的建立及应用

  

  1. 1.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002;2.河南省动物性食品安全重点实验室,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2014-01-07 出版日期:2014-06-15 发布日期:2014-06-15
  • 通讯作者: 王亚宾(1962-),男,河南灵宝人,教授,博士,主要从事动物微生物与免疫学研究。Email:ybwang8686@126.com
  • 作者简介:李栋梁(1989-),男,河南卫辉人,在读硕士研究生,研究方向:动物传染病流行病学。E-mail:497222038@sina.com
  • 基金资助:
     
    河南省重大科技攻关项目(112101110100);郑州市重点实验室项目(114PYFZX509)

  • Received:2014-01-07 Published:2014-06-15 Online:2014-06-15

摘要: 为建立快速检测引起奶牛乳房炎5种病原菌的方法,参照GenBank发表的产气荚膜梭菌乳酸乳球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、肠球菌序列、分别根据其16S rDNA保守序列区间设计5对引物,进行PCR扩增。结果显示:这5对引物均能针对自身菌株扩增出目的条带,且具有较强的特异性;产气荚膜梭菌、乳酸乳球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、肠球菌菌液DNA的最低检测量分别为3.40、0.89、0.91、3.30、3.60 ng/μL;对临床采集的疑似患有乳房炎的奶牛所产的牛奶样品进行检测,结
果显示,与传统的细菌分离鉴定相比,新建立的方法具有灵敏、高效的特性。

关键词: 奶牛乳房炎, 6S rDNA, PCR, 产气荚膜梭菌, 乳酸乳球菌, 变形杆菌, 绿脓杆菌, 肠球菌