摘要： 建立了草木樨状黄芪A4转化系原生质体再生植株的实验体系。以草木樨状黄芪发根农杆菌A4转化系再生植物幼叶为材料,通过酶解法,游离出大量有活力的原生质体,原生质体经培养持续分裂形成了愈伤组织,并分化出再生苗。比较了不同酶解时间、培养密度和培养基对原生质体分裂和再生植株的影响。结果表明,原生质体植板密度为3×105个/mL,采用液体浅层培养,在附加了2.0mg/L 2,4-D0、.5mg/L 6-BA、0.3mol/L甘露醇和2%蔗糖的DPD培养基中,可获得最高分裂频率,达32.4%。原生质体持续分裂形成愈伤组织可高频[(91.75±3.1)%]分化出再生苗。甘露碱纸电泳和PCR分析表明,外源基因T-DNA在原生质体来源的再生植株中仍然存在。
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