α-淀粉酶基因启动子-35区的诱变及其对大肠杆菌内表达量的影响

doi:10.3969/j.issn.1004-3268.2006.05.007

河南农业科学 ›› 2006, Vol. 35 ›› Issue (5): 24-27.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2006.05.007

α-淀粉酶基因启动子-35区的诱变及其对大肠杆菌内表达量的影响

黄春晓;崔锦;马向东;

河南农业大学生命科学学院,河南农业大学生命科学学院,河南农业大学生命科学学院河南郑州450002,中原工学院能源与环境学院,河南郑州450007,河南郑州450002,河南郑州450002

出版日期:2006-05-15 发布日期:2006-05-15
基金资助:
河南省重点科技攻关项目(0223013500)

Published:2006-05-15 Online:2006-05-15

摘要/Abstract

摘要： 对来自野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因(Gene Bank的序列号为AY167892)的启动子进行定点诱变,研究启动子的碱基改变对该基因在大肠杆菌中表达量的影响,在基因工程中有重要的意义。以α-淀粉酶基因连接到pBluescript KS+形成的重组质粒PHNH003为模板,通过PCR得到该α-淀粉酶基因启动子-35区上游序列截短141bp的基因,并通过定点诱变改变该截短基因启动子-35区第2位和第3位的碱基(即TGCACA→TTGACA),分别把这2个基因克隆至pBlue-script KS+并转化大肠杆菌DH5α。并把PHNH003转化至大肠杆菌DH5α,作为对照菌株。结果表明,含截短基因的菌株的α-淀粉酶活性比对照菌株提高24%;含点突变的截短基因的菌株的α-淀粉酶活性比对照提高100%。并分析了α-淀粉酶基因启动子-35区上游序列及-35区2个碱基的突变对基因在大肠杆菌中表达量的影响。

关键词: α-淀粉酶基因, 启动子, 定点诱变, 大肠杆菌, 表达

中图分类号:

Q814

黄春晓;崔锦;马向东;. α-淀粉酶基因启动子-35区的诱变及其对大肠杆菌内表达量的影响[J]. 河南农业科学, 2006, 35(5): 24-27.

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