猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液分离株的鉴定及进化分析

河南农业科学 ›› 2011, Vol. 40 ›› Issue (5): 152-157.

猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液分离株的鉴定及进化分析

王兴涛^1,2, 罗俊², 滕蔓², 樊剑鸣^2,3, 鄂巍^2,3, 禹斌⁴, 刘力¹, 张改平^2*

1. 西南大学动物科技学院, 重庆 400716; 2. 河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室, 河南郑州 450002; 3. 郑州大学生物工程系,河南郑州 450001; 4. 荥阳市畜牧局, 河南荥阳 450100

收稿日期:2011-02-20 出版日期:2011-05-15 发布日期:2011-05-15
通讯作者: 张改平(1960-),男, 河南内黄人, 研究员, 中国工程院院士, 博士, 博士生导师, 主要从事动物免疫学及重大疫病快速检测技术研究。E mail:zhanggaiping2003@yahoo.com.cn
作者简介:王兴涛(1984-),男, 河南原阳人, 在读硕士研究生, 研究方向: 动物流行病学。E??mail:xingtao210@126.com
基金资助:
国家公益性行业(农业)科研专项(200803015)

Received:2011-02-20 Published:2011-05-15 Online:2011-05-15

摘要/Abstract

摘要： 利用RT-PCR技术对河南省某规模化猪场乙脑疑似病例的种猪精液进行分析,从部分样本中扩增出与流行性乙型脑炎病毒(JEV)M基因和E基因具有高度同源性的预期产物。在3日龄乳鼠脑内接种种猪精液上清,10 d左右即出现典型神经症状,并且病死鼠脑组织RT-PCR结果均为阳性。用病死鼠脑组织研磨上清接种BHK-21细胞,感染60 h后用JEV单抗进行间接免疫荧光鉴定均为阳性,这表明分离毒株均为JEV流行毒株,分别命名为BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3。对新分离毒株进行体外细胞培养,BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3连续传代3次后病毒量均获得明显增加,最高分别可达104.5±0.1TCID50/mL和104.2±0.2TCID50/mL。用生物学软件MEGA 4.0分别构建JEV基因的系统进化树,发现BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3处于同一进化分支,均属于基因Ⅲ型。

关键词: , 流行性乙型脑炎病毒, 分离鉴定, M基因, E基因, 系统进化树, 基因Ⅲ型

王兴涛, 罗俊, 滕蔓, 樊剑鸣, 鄂巍, 禹斌, 刘力, 张改平. 猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液分离株的鉴定及进化分析[J]. 河南农业科学, 2011, 40(5): 152-157.

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