河南农业科学 ›› 2018, Vol. 47 ›› Issue (8): 123-127.
吴光松1,2，李 平3，顾丽菊4，林鹏飞1,2，任丽群3，杨 蓉1,2，黄维江1,2，张 芸5，毛同辉6，魏小红7，田松军7，燕志宏1,2*
摘要： 为了探索DGAT1和DGAT2基因对宗地花猪脂肪沉积效率的影响，以宗地花猪为试验动物，针对基因DGAT1和DGAT2 mRNA序列设计6对shRNA序列，构建RNA干扰表达载体，将DGAT1和DGAT2的shRNA干扰载体分别转染至肝细胞中，采用荧光定量PCR筛选出最佳shRNA干扰载体，并测定最佳干扰组细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇含量变化。结果显示，所构建的6个shRNA干扰载体均能抑制肝细胞中目的基因的表达，肝细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为78.45%和87.52%。转染干扰效率最佳的载体pGPU6/GFP/Neo-DGAT1-1和pGPU6/GFP/Neo-DGAT2-1后，肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量均降低，两者差异不显著（P>0.05）。转染pGPU6/GFP/Neo-DGAT2-1的肝细胞培养液中甘油三酯含量显著低于空白组（P<0.05），DGAT1干扰载体的干扰效率略低于DGAT2干扰载体（P>0.05）。综上，抑制DGAT1和DGAT2基因的表达，可降低肝细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇含量。
