河南农业科学 ›› 2009, Vol. 38 ›› Issue (3): 56-59.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2009.03.015

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甲拌磷人工抗原的合成及多克隆抗体制备

王翀;魏松红;李兴海;高伟;胡沙   

  1. 沈阳农业大学植物保护学院,辽宁沈阳110161
  • 出版日期:2009-03-15 发布日期:2009-03-15
  • 基金资助:
    沈阳农业大学中、青年硕士生导师资助项目

  • Published:2009-03-15 Online:2009-03-15

摘要: 以五硫化二磷与无水乙醇为原料,首先制得硫化物中间体,再添加甲醛和2-巯基乙醇进行反应,得到甲拌磷半抗原。在DMAP作为催化剂的条件下,甲拌磷半抗原与丁二酸酐反应,得到甲拌磷半抗原的衍生物。通过碳二亚胺法将甲拌磷半抗原衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)共价偶联,得到免疫抗原和包被抗原。用免疫抗原免疫兔子获得了高效价的多克隆抗体,抗血清效价达到了1:50000。通过试验确立甲拌磷标准曲线,检测限为6.383μg/L,检测线性范围为6.383-10000μg/L。

关键词: 甲拌磷, 半抗原, 人工抗原, 多克隆抗体

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