河南农业科学 ›› 2007, Vol. 36 ›› Issue (1): 34-38.DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2007.01.010

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根癌农杆菌介导的fad2 RNA干扰体基因转化甘蓝型油菜的研究

梁会娟1;曹刚强1;苗利娟2;田保明1;翁海波1;黄冰艳2;陈占宽2   

  1. 1郑州大学生物工程系,河南郑州450001;2河南省农业科学院生物技术研究所,河南郑州450002
  • 出版日期:2007-01-15 发布日期:2007-01-15

  • Published:2007-01-15 Online:2007-01-15

摘要: △12-油酸去饱和酶(Delta-12 oleate desaturase FAD2)是植物产生多聚不饱和脂肪酸的关键酶。对fad2基因表达进行抑制,可提高油菜种子油酸的相对含量。依据hpRNA介导的RNAi技术的原理,构建了以甘蓝型油菜fad2比基因为靶标的RNAi植物表达载体pCAMBIA3301-fad2i。以甘蓝型油菜Y14—1的带柄子叶作为转化受体,利用根癌农杆菌介导法,将厂乜dgRNA干扰体基因导入甘蓝型油菜中,获得了PPT抗性植株。同时还探讨了影响Y14—1品种转化频率的几个要素,为甘蓝型油菜的高效转化提供参考依据。对获得的再生植株进行GUS组织化学染色检测和PCR检测,证明外源基因已整合到油菜基因组中。

关键词: 甘蓝型油菜, 根癌农杆菌, FAD2, RNAI, 转化频率

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