摘要： 依据GenBank中注册的鸡马立克氏病病毒（MDV）、鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）、鸡痘病毒（FPV）基因组核苷酸序列中的保守序列设计引物，3种病毒各设计3对引物，共计9对引物，经生物学软件筛选后，得到3对相互匹配较佳的引物。3对匹配引物经单一PCR验证后，优化复合PCR反应条件，确定最佳的退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶浓度；经特异性、敏感性试验及简化PCR试验，建立简易复合PCR检测方法。复合PCR扩增出的3条带大小与预期一致，即228 bp（MDV）、400 bp（ILTV）、499 bp（FPV）；建立的复合PCR方法能同时检测出100 fg MDV、ILTV、FPV的DNA。同时依据PCR技术原理，将经典的三温热循环改进为二温热循环试验，即将退火和延伸合并为一步（62 ℃），缩短了反应时间。建立的3种病毒的复合PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性，可以用于临床病料的快速诊断。

关键词: 马立克氏病病毒, 传染性喉气管炎病毒, 鸡痘病毒, DNA病毒, 复合PCR