Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (11): 116-121,125.
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敖 静,桓明辉,李 杨,刘晓辉,高晓梅,徐 冲
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摘要: 为高效发酵鸡粪,在鸡粪发酵高温时期(≥50 ℃)筛选到11株菌株,确定其中1株高温细菌GX7具有较高的蛋白酶活力。经16S rDNA测序并进行同源性比较可知,GX7与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的16S rDNA 序列相似性达到100%;通过构建系统发育进化树,结合生理生化试验,鉴定GX7为枯草芽孢杆菌。通过绘制细菌生长曲线、测定细菌蛋白酶活力可知,细菌GX7的蛋白酶活力与菌数呈强正相关。从发酵培养基的组成及菌株的培养条件等方面优化枯草芽孢杆菌GX7产蛋白酶的条件,结果显示,最优培养基配方为:酵母浸膏1.5%、玉米粉1.5%、MgSO4 0.5%;最优培养条件为:pH值8.1、培养温度37 ℃、接菌量2%、装液量50 mL(250 mL)、摇床转速140 r/min。在此条件下,活菌数提高1个数量级,达到2.56×109 cfu/mL,蛋白酶活力提高约3倍,为26 U/mL。
关键词: 耐高温, 蛋白酶, 细菌, 鉴定, 发酵条件优化
敖 静,桓明辉,李 杨,刘晓辉,高晓梅,徐 冲. 1株耐高温产蛋白酶细菌的筛选鉴定及其液体发酵条件的优化[J]. 河南农业科学, 2016, 45(11): 116-121,125.
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