Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2015, Vol. 44 ›› Issue (12): 126-129.
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张 颖,刘恩平,陈海迪,高 旭*,张立媛,于清洋,鲁 承,梁晚枫
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摘要: 为制备抗延边白鹅IFN-γ蛋白的多克隆抗体,以已制备的pMD-IFN-γ质粒为模板,通过PCR扩增到延边白鹅IFN-γ基因,经TA克隆和BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切,将目的基因亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行 IPTG诱导表达,将经SDS-PAGE及Western blot鉴定正确的重组蛋白用GST标签纯化试剂盒纯化,以纯化的重组蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体并进行ELISA检测。结果显示,成功构建了原核表达载体pGEX-IFN-γ,表达的重组蛋白以包涵体形式存在,分子质量约为43 ku,制备的小鼠抗IFN-γ多克隆抗体效价为 1∶16 000。
关键词: 延边白鹅,  , IFN-&gamma, 基因, 原核表达, 多克隆抗体
张 颖,刘恩平,陈海迪,高 旭,张立媛,于清洋,鲁 承,梁晚枫. 延边白鹅IFN-γ基因的原核表达及其多克隆抗体的制备[J]. 河南农业科学, 2015, 44(12): 126-129.
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