Journal of Henan Agricultural Sciences ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (5): 158-162.

Received:2012-11-13 Published:2013-05-15 Online:2013-05-15

T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

王坤^1,2，李清州³，胡骁飞¹，李文君²，孙亚宁¹，王方丽¹，职爱民¹，邓瑞广¹，张改平^1*

1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002；2.河南科技大学食品与生物工程学院，河南洛阳 471003；3.河南省农业科学院农业经济与信息研究中心，河南郑州 450002

通讯作者: 张改平（1960-），男，河南内黄人，研究员，博士，主要从事动物免疫学及动物病毒分子致病机制研究。E-mail：zhanggaiping2003@yahoo.com.cn
作者简介:王坤（1987-），男，河南南阳人，在读硕士研究生，研究方向：食品安全。E-mail：wangkunbeijing2008@163.com
基金资助:
国家科技支撑计划项目(2011BAK10B01);农业部公益性行业(农业)科研专项(201203040);农业部公益性行业(农业)科研专项(201003008)

Abstract

摘要： 合成并鉴定T 2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T 2毒素多克隆抗血清。采用琥珀酸酐法将T 2毒素活化为T 2HS,T 2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原T 2 BSA和检测抗原T 2OVA,经鉴定后,分别按30、50μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后1次免疫10d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定其敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达到了1∶104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,其半数抑制质量浓度(IC50)为324ng/mL,且具有良好的特异性。成功合成了T 2毒素人工抗原,制备了多克隆抗体血清,为T 2毒素单克隆抗体的制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。

关键词: T-2毒素, 人工抗原, 多抗血清, ELISA

王坤，李清州，胡骁飞，李文君，孙亚宁，王方丽，职爱民，邓瑞广，张改平. T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备[J]. 河南农业科学, 2013, 42(5): 158-162.

T-2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

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